1.  血清、血浆样本收集：应使用一次性的无热原，无内毒素试管（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝均可），血清、血浆避免使用溶血，高血脂标本，标本悬浮物应离心去除，使标本清澈透明。
细胞培养液、上清样品收集：取细胞培养上清液 500ul，4 度，6000rpm 离心 5-10min；取上清。
 组织样品收集：将组织块用 PBS 漂洗干净，制成匀浆液，4 度离心(3500r/min, 30min) 取上清液。待测样本应尽早检测，2-8℃保存 48 小时；更长时间须冷冻（-20℃或-80℃）保存，避免反复冻融。

2.  标准品/样品稀释液（1×）的配置：1ml 标准品/样品稀释液（10×）+9ml 去离子水。

3.  标准品配制：取 8 个 1.5ml 离心管，分别标注 S1,S2,S3,S4,S5,S6,S7,blank,每管中各加入标准品/样品稀释液（1×）100ul，第一管 S1 中再加入标准品（5mg/ml）100ul，置于漩涡混合器上混匀后用加样器吸 100ul，移至第二管，如此反复作对倍稀释，从第七管（S7）中吸出 100ul 弃去，第八管为空白对照。标准曲线浓度为: 2500、1250、625、312.5、156.2、78.1、39、0 ug/ml 。

4.  样品的准备：取和检测样品相同数量的 1.5ml 离心管并编号，每管中分别加入对应检测样品100ul。

5.  如果您检测的样本中 靶蛋白浓度 高于标准品最高值，建议重新检测，请根据实际情况，适当倍数稀释(建议做预实验，以确定稀释倍数)。

1.  加提取液：将配置/分装好的标准品及待测样品放入 1.5ml 离心管架（1.5ml 双面板）上，每管中分别各加入提取液 100ul，震荡混匀后，室温静置 10 分钟。

2.  加显色液：每孔加入显色液 400ul，混匀后室温静置反应 10 分钟，将反应好的样品，8000 转离

心 1 分钟，取上清 100ul 对应加入微孔板中，（如检测样品澄清也可以不离心，直接取上清）。

3.  加 GSH 还原酶：在加好标准品及样品的微孔板中，每孔再加入 GSH 还原酶 100ul，混匀后室温静置反应 5 分钟。

4.  读 数：将反应好的微孔板 30 分钟内用酶标仪在 412nm 处读 OD 值。

1.  请自备 1.5ml 离心管及离心管架、水浴锅等常规检测设备及仪器。

2.  检测时所有试剂都要恢复到室温，试剂盒开封后剩余试剂放回袋中 1 个月内用完。

3.  实验前请认真仔细阅读此说明书，说明书以试剂盒内纸质版为准。

4.  本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！