TMB 显色时间控制的 3 个关键点

关键 1：提前准备终止液

显色反应一旦开始即不可逆。提前准备好终止液并置于加样器旁，确保能在最佳时间窗口内完成终止。

## 关键 2：使用计时器

推荐每板单独计时。多块板同时显色时，按加板顺序错开 1-2 分钟终止，避免手忙脚乱导致部分孔过显色。

## 关键 3：观察颜色变化

TMB 显色应呈蓝色（终止后变黄）。若 5 分钟内即呈深蓝，说明信号过强，需稀释样本或缩短显色时间。

## 常见误区

- 凭感觉估计时间：误差可达 ±2 分钟，对低丰度样本影响巨大

- 显色后搁置再终止：即使 30 秒延迟也会导致 OD 值漂移

- 不同温度下使用相同时间：25°C 与 37°C 显色速度差异可达 2 倍