移液器校准与加样误差控制
移液精度是 ELISA 定量可靠性的基础,掌握校准与操作规范。
移液器定期校准
- 频率:每周或每 40 小时使用
- 方法:用分析天平称量纯水,计算体积偏差
- 容差:100μL 量程 ±1% 以内,1000μL 量程 ±0.6% 以内
- 记录:建立校准日志,追踪漂移趋势
## 加样操作规范
1. 预润湿 tip:吸取前润湿 2-3 次
2. 垂直加样:tip 贴壁,缓慢推出
3. 排枪使用:标准品和样本用同一套排枪,减少系统误差
4. 加样顺序:先标准品后样本,避免交叉污染
## 实操技巧
- 每板单独标准曲线,不可跨板混用
- 更换 tip 品牌时需做平行验证
- 粘稠样本(如血清)使用反向移液模式
## 常见误区
- 长期不校准:使用 6 个月以上的移液器偏差可达 5%+
- 不同品牌 tip 混用:气密性差异导致系统误差
- 快速加样:产生气泡导致体积不准

