ELISA 抗体对选择的 5 条原则

原则 1：克隆识别不同表位

捕获抗体和检测抗体必须识别同一抗原的不同表位（至少 15-20 个氨基酸间距），避免空间位阻。

## 原则 2：抗体亚型匹配

- 捕获：IgG2a 或 IgG1，便于包被

- 检测：IgG1 优先，便于酶标

- 避免同亚型配对以减少非特异结合

## 原则 3：亲和力适中

过高亲和力会导致解离困难（尤其洗涤时），过低则灵敏度不足。Kd 值在 10⁻⁹~10⁻¹⁰ M 范围为宜。

## 原则 4：配对验证不可少

即使两个抗体单独性能优异，配对后可能因构象遮蔽而失效。必须用目标抗原做配对验证。

## 原则 5：考虑物种交叉反应

若需检测多种属样本，确认抗体对与目标物种抗原的交叉反应性。