洗板操作的关键细节
洗板是 ELISA 最关键的操作之一,掌握这些细节显著提升结果质量。
手工洗板要点
1. 加液量:每孔 ≥300μL(96孔板),确保完全覆盖孔底
2. 浸泡时间:30-60 秒,让未结合物质充分洗脱
3. 拍干技巧:在吸水纸上用力拍干,但不要让孔完全干燥(蛋白会变性)
4. 避免交叉污染:每孔单独操作,洗液不要溅入相邻孔
## 洗板机使用
- 程序设置:加液量 350μL,浸泡 30 秒,抽吸 5 秒
- 定期检查:针尖是否堵塞、是否对齐孔中心
- 洗液更换:每天更换新鲜洗液,避免污染
## 常见问题
- 残留洗液:最后一次拍干后,立即加入下一步试剂,不要长时间暴露
- 孔干燥:拍干后 5 分钟内加入试剂
- 泡沫产生:加液时沿孔壁缓慢加入,避免直接冲击孔底

